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Minerva Medica 2013 October;104(5):505-17

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lingua: Inglese

Effetto dell’inibizione dell’endotelina sui fibroblasti polmonari di pazienti con sclerosi sistemica

Corrado A. ¹, Neve A. ¹, Costantino E. ², Palladino G. P. ², Foschino Barbaro M. P. ², Cantatore F. P. ¹ ✉

¹ Rheumatology Clinic Department of Medical and Surgical Sciences University of Foggia, Foggia, Italy; ² Institute of Respiratory Diseases Department of Medical and Surgical Sciences “D’Avanzo” Hospital University of Foggia, Foggia, Italy

Obiettivo. Lo scopo dello studio è di valutare l’effetto dell'inibitore selettivo Sitaxsentan sulla vitalità e la differenziazione in miofibroblasti dei fibroblasti derivati da pazienti SSc-ILD e la capacità dell'endotelina A di modificare la sintesi dei fibroblasti polmonari di VEGF, collagene di tipo I e fibronectina.
Metodi. Sono state ottenute colture primarie di fibroblasti polmonari umani BAL di pazienti SSc-ILD. Le colture cellulari sono state esposte per 48 ore a concentrazioni crescenti di sitaxsentan (10 -6M a 10 -4M). In queste condizioni sperimentali abbiamo valutato la vitalità cellulare mediante colorazione con violetto di cristallo, la produzione e l’espressione mRNA di VEGF, fibronectina e collagene di tipo I, rispettivamente con ELISA e PCR in tempo reale. Inoltre, abbiamo rilevato l’alfa-actina del muscolo liscio (α-SMA) attraverso analisi immunocitochimica.
Risultati. La minor concentrazione di Sitaxsentan (10-6M) non ha alterato la vitalità dei fibroblasti; al contrario, a concentrazioni più elevate, il sitaxsentan ha indotto una significativa inibizione della vitalità cellulare. Sintesi ed espressione mRNA di VEGF, collagene di tipo 1 e fibronectina erano significativamente ridotti nei fibroblasti polmonari trattati rispetto a quelli non trattati, in modo dipendente dalla dose. A concentrazioni più elevate, Sitaxsentan ha ridotto l’espressione di α-SMA.
Conclusioni. I risultati di questo studio dimostrano che il Sitaxentan è in grado in vitro di ridurre sia la vitalità cellulare rispetto alla produzione di VEGF, sia i componenti della matrice extra-cellulare nei fibroblasti polmonari SSc, confermando il potenziale antifibrotico degli ETRA in SSc. La diminuita espressione di α-SMA nelle cellule trattate indica che il Sitaxsentan può inibire la differenziazione dei fibroblasti verso un fenotipo miofibroblastico e sostenere ulteriormente l’ipotesi che gli ETRA selettivi possano essere utili nei pazienti con SSc-ILD come agenti anti-fibrotici.