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Minerva Endocrinologica 2004 June;29(2):63-70

Copyright © 2004 EDIZIONI MINERVA MEDICA

lingua: Italiano

Valutazione metodologica di un metodo immunoenzimatico per la determinazione della Big-endotelina-1

Del Ry S., Maltinti M., Giannessi D.


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Obiettivo. La concentrazione plasmatica di Big-endotelina (ET)-1 sembra riflettere la sovraproduzione di ET più accuratamente dell'ET-1 circolante e quindi costituire un ulteriore marker per pazienti con patologie cardiovascolari. È stata effettuata una valutazione metodologica di un sistema immunoenzimatico per la determinazione della Big-ET-1 nel plasma, con o senza una fase preliminare di estrazione.
Metodi e Risultati. Per il metodo diretto la sensibilità è risultata di 0,15±0,010 fmoli/ml (n=27) e la variabilità tra saggi 2,5±0,062 (n=5), CV=5,6% e 1,47±0,09 fmoli/ml, CV=12,8% (n=4) rispettivamente per i 2 campioni utilizzati; la variabilità nel saggio è risultata 0,89±0,022 fmoli/ml, CV=5,6%.
Per il metodo con estrazione la sensibilità è risultata di 0,71±0,104 (n=6) fmoli/ml di estratto e la variabilità nel saggio 3,6±0,13 fmoli/ml, CV=7,4% (n=4).
Il confronto fra metodo diretto e metodo con estrazione, effettuato su 107 campioni di plasma a diversa concentrazione di peptide, ha indicato un buon accordo fra i risultati dei 2 metodi per valori di Big-ET-1 superiori indicativamente a 1 fmole/ml.
Conclusioni. La limitazione principale del metodo diretto è legata a possibili effetti d'interferenza, mentre quella del metodo con estrazione riguarda la corretta valutazione della resa di estrazione del singolo campione. Questi effetti diventano importanti quando si devono determinare bassi livelli di analita. Il metodo diretto potrebbe essere il metodo di scelta, sulla base di una maggiore semplicità di esecuzione, di un minore tempo analitico totale e di minori costi.

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